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大腸桿菌大腸菌群測(cè)試片（ECC）使用說明

方法編號(hào)：5021

1 原理及適用范圍：大腸桿菌（ Escherichia coli ）和大腸菌群（Coliform）都是存在于溫血?jiǎng)游锬c道和糞便的細(xì)菌，是條件性致病菌，主要造成水體污染，也可能引起食物中毒的發(fā)生。大腸桿菌大腸菌群測(cè)試片（E.coli / Coliform Count Plate）是一種預(yù)先制備好的一次性培養(yǎng)基產(chǎn)品，可以同時(shí)檢測(cè)大腸桿菌和大腸菌群，含有大腸菌選擇性培養(yǎng)基、冷水可溶性的吸水凝膠和半乳糖苷酶（GAL）和葡萄糖醛酸酶（GUD）指示劑。大腸桿菌顯藍(lán)色，其他大腸菌群顯紅色，藍(lán)點(diǎn)加上紅點(diǎn)為總的大腸菌群數(shù)。本產(chǎn)品適合于食品及原料中大腸菌群的計(jì)數(shù)，如消毒牛乳、冷飲和調(diào)味品等樣品的檢測(cè)，也可用于表面的衛(wèi)生檢測(cè)。

2 操作方法

2.1 樣品處理：取樣品 25 mL（g）放入含有225 mL滅菌生理鹽水的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi)，制成1:10的樣品勻液，用1mL滅菌吸管吸取1:10稀釋液1mL，注入含有9mL滅菌生理鹽水的試管內(nèi)，振搖后成為1:100的稀釋液。

2.2 接種：一般食品選1～2個(gè)稀釋度進(jìn)行檢測(cè)，含菌量少的液體樣品（如飲用純水和礦泉水等）可直接吸取原液進(jìn)行檢測(cè)。將大腸桿菌大腸菌群測(cè)試片（BE203）置于平坦實(shí)驗(yàn)臺(tái)面，揭開上層膜，用無菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上，然后再將上層膜緩慢蓋下，靜置5 min使培養(yǎng)基凝固，zui后用手輕輕地壓一下，每個(gè)稀釋度接種兩片。

2.3 培養(yǎng)： 將測(cè)試片疊在一起放回原自封袋中，透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，堆疊片數(shù)不超過12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃，培養(yǎng)15～24h。

3 結(jié)果判讀: 培養(yǎng)后大腸桿菌顯藍(lán)色，其他大腸菌群顯紅色，藍(lán)點(diǎn)加上紅點(diǎn)為總的大腸菌群數(shù)。選擇有陽性菌落的zui高稀釋度的測(cè)試片進(jìn)行計(jì)數(shù)，然后乘以稀釋倍數(shù)即為樣品中每毫升（克）含有大腸菌群數(shù)。

4 附加說明

4.1我國的食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)大多都以大腸菌群（ Coliform ）作為檢測(cè)指標(biāo)，而歐盟等許多國家則以大腸桿菌（E.coli）作為檢測(cè)對(duì)象，因此，本產(chǎn)品對(duì)于出口食品和航空配餐等企業(yè)具有更廣泛的應(yīng)用前景。

4.2 如果樣品的酸堿度pH 7.0以下時(shí)，應(yīng)先用滅過菌的堿性溶液（如1mol/LNaOH）調(diào)節(jié)到pH7.0-～8.0。

4.3大腸桿菌大腸菌群測(cè)試片對(duì)純菌的檢測(cè)靈敏度可達(dá)0.15 cfu/mL。

4.4一般食品對(duì)于大腸菌群的要求都比較嚴(yán)格，如果測(cè)試片上有成片的紅點(diǎn)，或者中央沒有紅點(diǎn)，但邊緣有很多紅點(diǎn)，一定是已經(jīng)嚴(yán)重超標(biāo)，建議按多不可計(jì)來報(bào)告。